qPCR

qPCR检测

qPCR Assay

基于实时荧光定量 PCR(SYBR Green / TaqMan 探针)检测目标基因的转录水平,提供 RNA 提取、反转录、引物设计验证与相对定量分析的一体化服务。

2
种定量体系
SYBR GREEN & PROBE
3–5
工作日检测周期
TURNAROUND
3
技术重复/样本
TECHNICAL TRIPLICATE

技术参数与送样

TECHNICAL SPECIFICATIONS
项目内容
检测方法实时荧光定量 PCR:SYBR Green 染料法 / TaqMan 探针法,可按基因数与特异性需求选择
检测对象mRNA 转录水平(相对定量,2^-ΔΔCt 法);也可提供绝对定量(标准曲线法)
样本类型组织(RNAlater 或液氮速冻)、细胞沉淀、全血(PAXgene / EDTA)、RNA(≥ 100 ng,RIN ≥ 7)
内参设置默认 GAPDH / ACTB,可按物种与组织确认更换;每板含 NTC 与阳性对照
结果交付扩增曲线、熔解曲线、Ct 值原始表、相对表达量图表与统计结果

服务流程

SERVICE WORKFLOW
1
需求沟通
目标基因 / 物种 / 样本类型
2
方案设计
引物设计与验证方案
3
样本接收
RNA 质检(浓度 / 完整性)
4
反转录与扩增
cDNA 合成 / qPCR 上机
5
数据分析
Ct 处理 / 相对定量 / 统计
6
报告交付
数据表 + 图表 + 解读

可选检测内容

ASSAY MENU
项目说明
基因表达定量目标基因在实验组与对照组间的相对表达差异(含生物学重复统计)
引物设计与验证按物种与转录本设计特异性引物,熔解曲线单峰 + 扩增效率 90–110% 方可使用
绝对定量构建标准曲线(10²–10⁸ 拷贝),输出拷贝数
miRNA / lncRNA 定量加尾法或茎环法反转录,专用引物体系
多基因 panel同一批样本同时检测多个目标基因,便于通路层面的联合分析

样本要求与送样

SAMPLE REQUIREMENTS
组织
≥ 30 mg,RNAlater 或液氮速冻
细胞
≥ 1×10⁶,去培养基后冻存
全血
≥ 500 μL(PAXgene / EDTA)
总 RNA
≥ 100 ng,RIN ≥ 7
送样说明:请注明物种、组织来源与目标基因列表(含转录本编号),冷冻样本请干冰运输。

应用场景

APPLICATIONS
基因表达验证(qPCR 验证测序结果)药物处理后通路基因变化转基因 / 敲除模型鉴定临床样本标志物转录水平检测

常见问题

FAQ
qPCR检测的实验周期是多久?
常规项目 1–3 周,视实验复杂度与样本量而定;涉及细胞建模或多批次处理的项目以方案确认为准。
可以自带试剂或抗体吗?
可以。客户可自带关键试剂 / 抗体,或由我们按方案代购;自带材料请附说明书与保存条件。
报告里包含原始数据吗?
包含。交付含原始记录(膜图、原始数值、图像文件等)与整理后的统计分析结果,数据可溯源。
qPCR检测对样本有什么要求?
ELISA 血清/血浆 ≥50 μL、WB 细胞裂解液蛋白 ≥20 μg、流式样本 ≥100 μL(24 h 内检测)、组织切片 ≥0.5 cm³(4% 多聚甲醛固定 24–48 h,冰冻样本 OCT 包埋后干冰运输)。详见《技术资源 → 样本相关》。

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