| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 检测平台 | Q Exactive 高分辨质谱，正负离子切换，同位素体分辨采集；GC-MS / LC-MS 双平台互补 |
| 样本要求与体系 | 体外细胞模型（肿瘤细胞、原代细胞、干细胞）· 体内动物模型 · 微生物发酵体系 · 植物组织 · 血浆等体液；标记处理后样本液氮速冻、干冰寄送 |
| 交付成果与周期 | 统计表 · MID 表 · 分析报告；标准项目周期 4–6 周 |
| 客户需确认的信息 | 研究背景与科学问题 · 样本类型与比较组设计 · 目标代谢通路 · 预计样本量与标记底物 |
| 示踪通路 | 常用标记底物 / 代表性示踪剂 · 可解析方向 |
|---|---|
| 1 · 糖代谢流 GLUCOSE FLUX | [U-13C]葡萄糖 / [1,2-13C]葡萄糖 / [1,6-13C]葡萄糖 / [2,3-13C]葡萄糖 — 糖酵解、TCA 循环与磷酸戊糖通路的通量分配；[1,6-13C] 与 [2,3-13C] 分别用于区分 PPP 分支与丙酮酸脱氢酶活性；肿瘤与增殖细胞的 Warburg 效应定量 |
| 2 · 脂肪酸代谢流 FATTY ACID FLUX | [U-13C]乙酸 / [U-13C]棕榈酸 — de novo 脂肪酸合成（DNL）vs 外源摄取的相对贡献；乙酰辅酶 A 池与脂肪酸 β-氧化；碳链延长与去饱和去向 |
| 3 · 核苷酸代谢流 NUCLEOTIDE FLUX | [U-13C]核苷（酸）/ [15N4]次黄嘌呤 — 嘌呤 / 嘧啶从头合成与补救通路的权衡；增殖相关的核苷酸需求来源解析 |
| 4 · 氨基酸代谢流 AMINO ACID FLUX | [U-13C]谷氨酰胺 / [酰胺-15N]谷氨酰胺 / [U-13C]丝氨酸 — 谷氨酰胺分解、TCA 回补反应与转氨基反应的氮流向；氨基酸之间的碳骨架互换 |
| 5 · 叶酸 / 一碳代谢流 ONE-CARBON FLUX | [U-13C]丝氨酸 / [U-13C]甘氨酸 — 一碳单位供给、嘌呤合成与甲基化反应的碳源归属；叶酸循环效率评估 |
| 6 · 尿素循环代谢流 UREA CYCLE FLUX | 15N-NH4Cl / [酰胺-15N]谷氨酰胺 — 氮代谢与尿素循环通量；氨清除效率与嘌呤合成中的 15N 去向 |
| 分析模块 | 方法与指标 · 主要产出 |
|---|---|
| 数据预处理 | 代谢物峰提取与积分、质量同位素体（M+0 / M+1 / M+2 …）信号提取、样本命名与分组映射、低质量峰过滤 — 原始与校正后的 MID 数据表 |
| 天然丰度校准 | 扣除 13C / 15N / 18O / 2H 等天然同位素本底（矩阵法校正）；以校准残差 RMS 评估校正质量 — RMS 条形图、校正前后对比图 |
| 标记率总览 | 标记率（富集度）= 各 m+ 加权平均标记比例；分组平均标记率比较、样本间相关性矩阵 — 标记率热图、分组平均条形图 |
| MID 组成分布 | 样本间同位素标记比例分布、样本内 m+ 分布、分组 MID 组成对比（均值 ± SD）— 分布图组、MID 组成统计表 |
| 组间对比与跨对比汇总 | 每个比较组独立统计（标记率差异、差异 MID）；多比较组汇总热图与差异代谢物韦恩图 — 差异标记代谢物列表与交集列表 |
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