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title: "样本相关"
lang: zh
url: https://www.gereallife.com/zh/services/resources-samples.html
canonical: https://www.gereallife.com/zh/services/resources-samples.html
entity: Shanghai Gereallife Biotech Co., Ltd
updated: 2026-11-02
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## 01可接收样本类型

 

Gereallife 多组学平台支持多种生物样本类型，覆盖临床与科研常见需求

### 血液类

全血、血清、血浆 PAXgene 稳定管

### 组织类

新鲜组织、冷冻组织 FFPE 石蜡切片、OCT 冰冻切片

### 细胞与体液

培养细胞、PBMC 脑脊液、尿液、唾液

### 微生物

粪便、肠道内容物 土壤、水体、拭子

### 植物

叶片、根系、种子 愈伤组织

### 其他样本

DNA、蛋白质或 代谢物提取物请咨询工作人员

 
 
 

## 02样本采集通用要求

 

规范采集是获得高质量组学数据的前提，以下要点适用于绝大多数样本类型

### 采集时效

样本离体后应尽快处理或冷冻，代谢组与转录组样本建议在30分钟内完成冷冻或加入稳定剂。

### 避免反复冻融

样本分装后保存于-80℃，避免反复冻融；如需运输，使用干冰维持低温环境。

### 防止污染

微生物与核酸类样本需使用无菌耗材，佩戴手套口罩，避免外源DNA/RNA污染。

### 完整信息记录

记录样本编号、采集时间、处理方式和临床信息，确保后续数据与表型准确对应。

 
 
 

## 03各组学服务的样本要求

 

同一份样本送不同组学，要求并不一样。下列分组按服务类型给出「建议样本量 / 采集与处理要点」，点击展开查看；具体项目以方案确认的《样本收集指南》为准。

 代谢组学（非靶向 / 靶向 / 脂质组学） LC-MS 

| 样本类型 | 建议量 | 采集与处理要点 |
| --- | --- | --- |
| 血清 / 血浆 | ≥ 100 μL | 空腹采血，EDTA 或肝素抗凝；4 ℃ 3000 g 离心 10 min 取上清，2 h 内分装冻存 |
| 组织 | ≥ 50 mg | 离体后快速冲洗（去血污），液氮速冻；避免反复冻融 |
| 细胞 | ≥ 1×10⁶ | PBS 洗 2 次去培养基，弃上清后直接液氮速冻 |
| 尿液 | ≥ 200 μL | 中段尿，离心去沉淀，分装冻存 |
| 粪便 | ≥ 100 mg | 无菌管采集，2 h 内 −80 ℃，避免反复温度波动 |
| 植物 / 微生物 | ≥ 100 mg | 液氮研磨后冻存；微生物需标注培养条件与培养基 |

 

### 采集建议

 
- 同一项目统一样本类型与抗凝剂，血清与血浆不可混用
- 代谢物易受饮食影响，临床样本建议统一空腹时间并记录
- 避免使用含表面活性剂或高浓度盐的缓冲液，会干扰色谱
- 分装为单次用量，一次性使用，杜绝二次冻融 

注意：靶向定量项目按目标物质清单核算样本量，部分低丰度物质需要更大体积，请在方案阶段确认。

### 采血与处理步骤（血清 / 血浆）

 
- 空腹 8–12 h 采血；抗凝管按项目统一（EDTA 或肝素），血清用促凝管
- 采血后室温静置 30 min（血清）或立即轻柔混匀 5–8 次（血浆）
- 4 ℃、3000 g 离心 10 min，取上清；避免吸到白膜层与溶血样本
- 按 100–200 μL/管分装，标好编号与时间，2 h 内转入 −80 ℃
- 运输：干冰，保持 −70 ℃ 以下；到样前干冰不得耗尽 

### 组织与细胞处理步骤

 
- 组织离体后 5 min 内用预冷 PBS 冲洗去血污，剔除脂肪与结缔组织
- 切成 ≤ 50 mg 小块，液氮速冻 30 s 以上，转入 −80 ℃
- 细胞用预冷 PBS 洗 2 次去培养基（残留血清会干扰色谱）
- 弃上清后直接液氮速冻细胞沉淀，不要加 PBS 冻存 

### 常见错误

 
- × 血清与血浆混用、抗凝剂不统一 → 组间不可比
- × 样本只冻一次后反复解冻取样 → 代谢物降解、重复性差
- × 用含高浓度盐或表面活性剂的缓冲液 → 抑制离子化、污染色谱柱
- × 溶血样本仍用于靶向定量 → 胞内物质外泄导致假性升高 
 代谢流同位素示踪 13C / 15N 

| 样本类型 | 建议量 | 采集与处理要点 |
| --- | --- | --- |
| 细胞（示踪培养） | ≥ 2×10⁶ / 时间点 | 标记到时后快速淬灭（液氮或冷甲醇），全程冰上操作 |
| 组织 | ≥ 100 mg | 标记结束即刻液氮冻存，记录取样时间点 |
| 培养基上清 | ≥ 200 μL | 与细胞同时间点收集，过滤后冻存，用于底物消耗计算 |

 

### 采集建议

 
- 时间点必须成组设计（如 0 / 15 min / 1 h / 4 h），并在方案中固定采样顺序
- 淬灭速度决定能否捕捉到真实通量，取样后应立即低温处理
- 同批实验需同步留取未标记对照，用于天然丰度校正
- 记录示踪剂批号、浓度与加入时刻，便于复现 

注意：示踪剂、标记时长与淬灭方式需在预实验中确认，直接决定可解析的通路范围。

### 标记实验步骤

 
- 预实验确定示踪剂浓度、标记时长与淬灭方式（不同通路差异很大）
- 细胞达到目标汇合度后换用含示踪剂的新鲜培养基，记录加入时刻 T0
- 按设计的时间点依次取样，每个时间点独立淬灭（勿先收集再统一处理）
- 淬灭后离心收集细胞沉淀，与培养基上清分别冻存并标号
- 始终保留一组未标记对照，用于天然丰度（natural abundance）校正 

### 关键参数建议

 
- 时间点：至少 3–4 个（如 0 / 15 min / 1 h / 4 h），覆盖上升段而非仅稳态
- 重复：每个时间点 ≥ 3 个生物学重复，且各时间点单独培养起始
- 淬灭：液氮速冻或 −20 ℃ 冷甲醇（≥ 4 倍体积），全程冰上操作
- 记录：示踪剂批号、加入体积、培养温度与取样精确时刻 

### 常见错误

 
- × 所有时间点从同一批细胞连续取样 → 细胞状态已被改变
- × 标记时间过长达 24 h → 接近稳态，通量信息丢失
- × 淬灭不彻底 → 酶促反应继续，MID 分布偏移 
 蛋白组学（DIA / 修饰 / PRM） LC-MS/MS 

| 样本类型 | 建议量 | 采集与处理要点 |
| --- | --- | --- |
| 细胞 | ≥ 1×10⁶ | PBS 洗去血清，直接加裂解液或液氮速冻 |
| 组织 | ≥ 50 mg | 去血污、去结缔组织，液氮速冻后 −80 ℃ |
| 血清 / 血浆 | ≥ 50 μL | 避免溶血，分装冻存；高丰度蛋白去除与否按项目确认 |
| FFPE 切片 | ≥ 4 张（5 μm） | 标注蜡块年份与染色情况，常温干燥保存 |

 

### 采集建议

 
- 全程使用低吸附耗材，避免角蛋白污染（戴口罩手套）
- 裂解后尽快变性处理，减少蛋白酶降解
- 修饰组学（磷酸化等）建议同步留取对照样本，且避免使用磷酸盐缓冲液
- PRM 验证项目需提供目标蛋白列表，便于方法开发 

注意：蛋白样本对冻融极其敏感，建议一次分装后仅解冻一次。

### 样本处理步骤

 
- 细胞：PBS 洗 2 次，直接加裂解液（含蛋白酶抑制剂）或液氮速冻沉淀
- 组织：去血污与结缔组织后称重，按 1:5–1:10 (w/v) 加裂解液，冰上匀浆
- 血清/血浆：避免溶血，按项目要求决定是否去除高丰度蛋白
- 裂解液 4 ℃、12000–15000 g 离心 10–15 min，取上清测浓度
- 按 100–200 μg/管分装，−80 ℃ 保存；运输干冰 

### 修饰类项目特别注意

 
- 磷酸化：全程避免磷酸盐缓冲液；建议同步留取对照，便于区分本底
- 乙酰化/泛素化：加去乙酰化酶/去泛素化酶抑制剂，裂解后尽快变性
- FFPE：标注蜡块年份、固定时间与染色史，切片厚度 5 μm、≥ 4 张
- PRM：提供目标蛋白与肽段列表，便于方法开发与保留时间确认 

### 常见错误

 
- × 未戴口罩手套 → 角蛋白污染掩盖低丰度蛋白
- × 裂解后室温放置过久 → 蛋白降解、修饰丢失
- × 样本量按"湿重"估算但含大量水分/脂肪 → 实际蛋白量不足 
 基因转录测序（转录组 / 扩增子 / 宏基因组 / WGS） NGS 

| 样本类型 | 建议量 | 采集与处理要点 |
| --- | --- | --- |
| 总 RNA（转录组） | ≥ 1 μg，RIN ≥ 7 | 液氮速冻，干冰运输；避免 RNase 污染 |
| 组织（RNA later） | ≥ 50 mg | 切成 ≤ 5 mm 薄片后浸入 RNA later，4 ℃ 过夜后 −20 ℃ |
| 粪便 / 土壤（扩增子、宏基因组） | ≥ 200 mg | 无菌采集，−80 ℃ 保存，避免反复冻融 |
| 全血（WGS） | ≥ 500 μL | EDTA 抗凝，禁止肝素；4 ℃ 短期保存，长期 −80 ℃ |

 

### 采集建议

 
- RNA 样本完整性优先于浓度，降解样本不建议上机
- 微生物样本需记录采样部位、时间与环境信息，便于后续分组
- 同一批测序建议统一建库方式，降低批次效应
- 干冰运输时保证到样前干冰未耗尽 

注意：扩增子与宏基因组对采样污染非常敏感，请使用无菌耗材并留取空白对照。

### RNA 样本处理步骤

 
- 组织离体后立即切成 ≤ 5 mm 薄片，液氮速冻或浸入 RNA later（4 ℃ 过夜后 −20 ℃）
- 提取后测浓度与 RIN 值，RIN ≥ 7 方可用于建库
- RNA 样本 −80 ℃ 保存，避免反复冻融；运输干冰
- 同时保留一份备份，防止运输损耗 

### 微生物与 DNA 样本步骤

 
- 粪便/土壤：无菌管采集 200 mg 以上，标号后 2 h 内 −80 ℃
- 采样时同步留取空白对照（同批次耗材开管操作），用于污染评估
- 全血：EDTA 抗凝，禁用肝素（抑制后续酶反应）
- DNA 样本要求 A260/280 在 1.8–2.0，避免反复冻融与强光照射 

### 常见错误

 
- × RNA 降解仍送样 → 建库失败或 3′ 偏好
- × 粪便样本常温放置过久 → 菌群结构漂移
- × 同一比较组分批建库 → 批次效应掩盖生物学差异 
 单细胞转录组测序 scRNA-seq 

| 样本类型 | 建议量 | 采集与处理要点 |
| --- | --- | --- |
| 细胞悬液 | 细胞浓度 700–1200 个/μL，活率 ≥ 80% | 现制现送，冰上运输，4 h 内上机 |
| 组织（需解离） | ≥ 100 mg | 离体后立即低温保存，注明酶解耐受性与目标细胞类型 |
| 外周血 / PBMC | ≥ 3 mL 全血 或 ≥ 1×10⁶ PBMC | EDTA 抗凝，避免溶血，优先新鲜样本 |

 

### 采集建议

 
- 悬液质量决定数据质量：要求无明显团块、无大量碎片
- 解离时间尽量短，避免应激基因表达升高
- 避免使用含 Ca²⁺/Mg²⁺ 的缓冲液长时间保存细胞
- 若需保存，可按项目确认使用冻存方案并做复苏活率评估 

注意：单细胞项目建议先做小样预实验评估活率与细胞类型比例，再确定正式上样量。

### 悬液制备与送样步骤

 
- 组织解离：低温、短时、温和酶解，目标活率 ≥ 80%、无团块
- 用 40 μm 滤网过滤，离心后用含 BSA 的缓冲液重悬
- 调整浓度至 700–1200 个/μL，计数并记录活率
- 现制现送，2–8 ℃ 运输，4 h 内上机；避免剧烈震荡 

### 关键参数建议

 
- 目标细胞数：按项目目标捕获数反推，一般上样高于目标 1.5–2 倍
- 解离时间尽量 ≤ 30 min，过长会诱导应激基因（Fos/Jun 等）高表达
- 避免含 Ca²⁺/Mg²⁺ 缓冲液长时间保存；不使用固定剂处理活细胞标记样本 

### 常见错误

 
- × 悬液含大量碎片/死细胞 → 空液滴比例升高
- × 样本放置数小时才上机 → 活率骤降、转录本降解
- × 组织块过大未充分解离 → 细胞类型比例失真 
 分子细胞实验与病理制片（ELISA / WB / 流式 / 切片） Assay 

| 样本类型 | 建议量 | 采集与处理要点 |
| --- | --- | --- |
| 血清 / 血浆（ELISA） | ≥ 50 μL | 避免溶血与反复冻融，建议一次分装 |
| 细胞裂解液（WB） | ≥ 20 μL，蛋白 ≥ 20 μg | 冰上裂解，加蛋白酶抑制剂，尽快变性 |
| 全血 / 悬液（流式） | ≥ 100 μL | EDTA 抗凝，24 h 内检测；标注目标标记 |
| 组织（切片） | ≥ 0.5 cm³ | 4% 多聚甲醛固定 24–48 h；冰冻样本 OCT 包埋后干冰运输 |

 

### 采集建议

 
- 固定不足或过度固定都会影响抗原暴露，按推荐时间执行
- 免疫组化如需代购抗体，请提前确认种属与克隆号
- 流式样本避免使用固定剂后再染活细胞标记
- 制片方向要求（横切/纵切）请在送样单注明 

注意：病理类样本的取材部位直接决定结果解释，建议同时提供 H&E 参考片或影像定位。

### 分项处理步骤

 
- ELISA：血清/血浆 ≥ 50 μL，避免溶血，分装单次用量
- WB：冰上裂解（含蛋白酶抑制剂），BCA 定量后按 ≥ 20 μg/管分装并变性
- 流式：EDTA 抗凝全血或悬液 ≥ 100 μL，24 h 内检测，标注目标标记与同型对照
- 切片：4% 多聚甲醛固定 24–48 h（≤ 1.5 cm 厚），梯度脱水后石蜡包埋
- 冰冻切片：OCT 包埋，目标切面朝下，干冰运输，避免反复冻融 

### 关键参数建议

 
- 固定：时间不足抗原暴露不全，过度固定（> 72 h）导致表位封闭
- 切片厚度：石蜡 4–5 μm、冰冻 8–10 μm，按实验目的确认
- 免疫组化：如需代购抗体，请提供种属、克隆号与预期定位
- 切片方向（横切/纵切）与取材部位请在送样单注明，必要时附 H&E 参考片 

### 常见错误

 
- × 组织块过大导致固定液渗透不足（中心自溶）
- × 流式样本固定后再染活细胞标记 → 结果假阴性
- × 冰冻样本未 OCT 包埋直接冻存 → 切片碎裂 

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## Q&A常见问题

 我手上只有 FFPE 蜡块，还能送吗？ 可以，组织类样本接收新鲜组织、冷冻组织、FFPE 石蜡切片和 OCT 冰冻切片。 
 样本采完放冰上，下午再冻可以吗？ 不建议。样本离体后应尽快处理或冷冻，代谢组与转录组样本建议在 30 分钟内完成冷冻或加入稳定剂。 
 寄样要用干冰吗？ 要用。样本分装后保存于 -80℃，避免反复冻融；运输时用干冰维持低温环境。 
 尿液、唾液、脑脊液这些能收吗？ 能收。细胞与体液类样本除培养细胞和 PBMC 外，也接收脑脊液、尿液和唾液。 
 我自己提好的 DNA 或蛋白，能直接寄过去测吗？ DNA、蛋白质或代谢物提取物归在其他样本里，需要先咨询工作人员确认。 
 
 
 
 
 
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